ParoReal Kit Acanthamoeba T4

Deteção do gene 18S rRNA de Acanthamoeba genotipo T4.

Introdução: O género Acanthamoeba é principalmente um protozoário de vida livre em habitats naturais, mas também agente causador de doenças humanas e animais. Acanthamoeba serve como hospedeiro para uma variedade de bactérias patogénicas, como Mycobacterium avium. A infestação com Acanthamoeba está associada a queratite relacionada a lentes de contato potencialmente ameaçadora à visão, infeções graves de outros órgãos e encefalite amebiana granulomatosa fatal. São conhecidas mais de 20 espécies de Acanthamoeba, que podem ser classificadas em três grupos morfológicos (Grupo I, II e III) e 22 genótipos (T1-T22). Algumas espécies ((A. castellanii (T4), A. lugdunensis (T4), A. polyphaga (T4), A. rhysodes (T4), A. quina (T4), A. palestinensis (T2), A. griffinii (T3), A. lenticulata (T5), A. astronyxis (T7), A. culbertsoni (T10), A. hatchetti (T11), A. healyii (T12), A. byersi (T18), A. divionensis) têm recentemente associado a doenças humanas. O genótipo T4 tem sido considerado o genótipo mais importante na infeção ocular e do SNC. De acordo com a literatura, o genótipo T4 é o genótipo de Acanthamoeba mais prevalente que causa queratite em todo o mundo (aproximadamente 86%) (Diehl et al., 2021).

Descrição: ParoReal Kit Acanthamoeba T4 é um teste de IVD não automatizado, baseado em PCR em tempo real, para a deteção qualitativa de DNA (gene 18S rRNA) de Acanthamoeba espécies do genótipo T4 (A. castellani, A. lugdunensis, A. mauritaniensis, A. polyphaga, A. rhysodes, A. royreba). O genótipo T4 é o mais prevalente (aproximadamente 86%) O genótipo de Acanthamoeba causa queratite em todo o mundo. O teste não deteta outros genótipos de Acanthamoeba (T3, T15, T11 e T5) que também causam queratite. Amostras adequadas são extratos de DNA de amostras clínicas humanas associadas a queratite (swabs oculares, biópsias de córnea, pontos oculares, raspados de córnea), bem como lentes de contato e solução para lentes de contato. Este teste é adequado para pacientes de todas as idades com suspeita de infeção por Acanthamoeba genótipo T4 (agente causador de queratite por Acanthamoeba, AK) e destina-se a auxiliar no diagnóstico de infeção por esse patógeno em combinação com o histórico do paciente e informações clínicas adicionais. O teste é apenas para uso profissional e o uso é limitado a pessoal qualificado instruído em PCR em tempo real e procedimentos de diagnóstico in-vitro. As espécies de Acanthamoeba do genótipo T4 causam aprox. 86% da queratite por Acanthamoeba em todo o mundo (Diehl et al., 2021). O gene 18S rRNA de Acanthamoeba é um gene multicópia. O número de repetições de rRNA em células de Acanthamoeba é de 24 por genoma haplóide. No entanto, como Acanthamoeba é poliplóide, cada célula contém aproximadamente 600 genes de rRNA (Yang et al., 1994). Uma curva de amplificação específica da sonda no canal FAM (530 nm) indica a amplificação do DNA específico de Acanthamoeba. Um controlo positivo de DNA interno (DNA IPC) é detetado no canal Cy5 e é usado como extração de DNA, bem como controlo de inibição de PCR em tempo real. O alvo para o DNA IPC (DNA alvo artificial) é extraído com a amostra.

Características do produto:
- Amplificação e deteção: gene 18S rRNA do genótipo T4 de Acanthamoeba
- PCR em tempo real com rápida hot-start Taq DNA polimerase
- Corante ROX™ como referência passiva
- Sistema de Controlo Positivo Interno para excluir resultados falso-negativos
- Otimizado para lidar com inibidores de PCR
- Plataformas de PCR: executa em todas as plataformas de PCR em tempo real padrão estabelecidas
- Perfis térmicos harmonizados para executar amostras de RNA e DNA simultaneamente