Vitamina H (Biotina) ELISA

Imunoensaio enzimático para determinação quantitativa de Biotina (Vitamina H) em matriz alimentar.

Introdução: A biotina serve como o grupo prostético de enzimas, que catalisam as carboxilações no organismo. Para isso, a biotina liga-se através de seu grupo carboxila a resíduos de lisina de carboxilases, e a transferência de dióxido de carbono ocorre após sua ligação a um átomo de nitrogénio da biotina, formando o chamado dióxido de carbono ativo.
A conscientização da população para uma boa saúde e seu interesse por uma alimentação saudável aumentou significativamente nos últimos anos. Depois que o teor de vitaminas em sua alimentação ganhou importância para o consumidor, o alimento foi parcialmente vitaminado pelo fabricante. Quando há falta de biotina, podem aparecer seborreia, dermatite, anorexia, dores musculares, cansaço e distúrbios nervosos. Como a biotina é sintetizada pela flora intestinal humana, os sintomas de deficiência são raros, porém aparecem após a ingestão excessiva de clara de ovo crua, o que pode ser explicado pelo seu conteúdo de avidina ligadora da biotina.

Descrição: O teste quantitativo de vitamina H (Biotina) é baseado no princípio do ensaio imunoenzimático. A avidina, que apresenta alta afinidade com a biotina, é ligada à superfície de uma placa de microtitulação. Amostras ou padrões contendo biotina e um conjugado biotina-fosfatase alcalina são administrados nos poços da placa de microtitulação. As enzimas marcadas e a biotina livre competem pelos sítios de ligação. Após uma hora de incubação à temperatura ambiente, os poços são lavados com solução de lavagem diluída para remover o material não ligado. Uma solução de substrato é adicionada e incubada por 30 minutos, resultando no desenvolvimento de uma cor amarela. O desenvolvimento da cor é inibido pela adição de uma solução stop. A cor amarela é medida fotometricamente a 405 nm. A concentração de biotina é indiretamente proporcional à intensidade da cor da amostra de teste.

Características do produto:
- O kit contém reagentes para 96 ​​determinações;
- Placa de microtitulação composta por 12 tiras com 8 poços quebráveis;
- Padrões de biotina: 0, 1, 2.5, 5, 10, 25 ng/mL;
- Leitor de ELISA a 405 nm;
- Faixa padrão: 1- 25 ng/mL;
- Sensibilidade analítica: 0.5 ng/mL.