Melatonina ELISA

Ensaio imunoenzimático altamente sensível para a determinação quantitativa de melatonina em saliva humana.

UTILIZAÇÃO PRETENDIDA: O ensaio Melatonin ELISA (MLTN-96) destina-se à determinação quantitativa altamente sensível de melatonina em saliva humana. Apenas para utilização em investigação. Não se destina a utilização em procedimentos de diagnóstico.

INFORMAÇÃO GERAL: O Melatonin ELISA é um imunoensaio competitivo baseado na técnica de anticorpo de captura. A melatonina presente nas amostras de saliva pré-tratadas ou em extratos de soro/plasma, bem como nos controlos e calibradores, compete com a melatonina biotinilada pelos locais de ligação do anticorpo policlonal anti-melatonina Kennaway G280 durante uma incubação noturna.

Durante esta incubação, os complexos anticorpo–melatonina–biotina formados são capturados nos poços previamente revestidos da microplaca. Após a lavagem para remoção do conjugado não ligado, é adicionado o conjugado enzimático (estreptavidina ligada à peroxidase de rábano – HRP), que se liga aos locais de biotina livres nos complexos imobilizados, durante uma incubação de 60 minutos.

Segue-se uma nova etapa de lavagem para remoção do conjugado não ligado e a adição do substrato TMB (tetrametilbenzidina). Após 30 minutos de incubação adicional, forma-se um cromóforo cuja intensidade é inversamente proporcional à quantidade de melatonina presente inicialmente nas amostras, controlos e calibradores. A adição da solução de paragem ácida provoca a mudança de cor de azul para amarelo, sendo a absorvância medida a 450 nm.

CARACTERÍSTICAS DO KIT:
- Método: ELISA
- Ensaios: 96
- Tempo de incubação / condições: 1 min (agitação), 16–24 h (2–8°C), 60 min, 30 min (RT/agitação)
- Intervalo padrão: 0,5 - 50 pg/mL
- Volume final da amostra: 100 µL
- Tipo de amostra: saliva
- Pré-tratamento da amostra: solução de pré-tratamento
- Isótopo/Substrato: TMB 450 nm
- Controlos internos: 2
- Estado regulamentar: RUO