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Purificação de plasmídeo: Método eficiente e rápido para a purificação de DNA plasmidial de alta qualidade de 1-6 ml de células bacterianas cultivadas. O DNA eluído é adequado para todas as aplicações comuns a jusante, incluindo PCR, digestão com restrição enzimática, clonagem e sequenciamento de DNA PRODUTO: O GRS Plasmid Purification Kit fornece um método rápido e eficiente para a purificação de DNA de plasmídeo de alta qualidade de 1 a 6 ml de células bacterianas em cultura. O DNA eluído é adequado para todas as aplicações comuns a jusante, incluindo PCR, digestão de restrição enzimática, clonagem e sequenciamento de DNA. Princípio: O GRS Plasmid Purification Kit é baseado em um método de lise alcalina modificado usado para obter contaminantes de DNA genômico mínimo (1). O tratamento com RNAse A reduz a contaminação com RNA. O tampão de lise azul é adicionado para garantir a lise celular eficiente e a precipitação de SDS. O sistema tampão é otimizado para permitir a ligação do DNA de plasmídeo na presença de sais caotrópicos à matriz de fibra de vidro da coluna de spin (2). Os contaminantes são removidos usando um tampão de lavagem (contendo etanol) em uma simples etapa de centrifugação. O DNA de plasmídeo purificado é subsequentemente eluído por um tampão de eluição com baixo teor de sal ou TE ou água. Todo o procedimento pode ser concluído em 20 minutos sem extração de fenol / clorofórmio ou precipitação com álcool, com um rendimento de DNA típico de 20-30μg para plasmídeos de alto número de cópias ou 3-10μg para plasmídeos de baixo número de cópias de 4,5 ml de células bacterianas em cultura.