ELISA de interleucina-10 humana

Introdução:A interleucina-10 humana (IL-10) é uma linfocina de 19 kDA produzida por linfócitos T auxiliares, monócitos, macrófagos e linfócitos B. A IL-10 foi inicialmente caracterizada como um fator inibitório da síntese de citocinas (CSIF) capaz de inibir a síntese de citocinas por clones TH1 ativados na presença de células apresentadoras de antigénios. No entanto, na ausência de monócitos, a IL-10 inibe diretamente o crescimento de células T desencadeado por MoAb anti-CD3 imobilizado. Descobriu-se que essa inibição da proliferação é resultado da inibição específica da produção de IL-2 pelas células T responsivas. In vitro, a IL-10 é um inibidor muito potente de monocinas (incluindo TNF-α, IL-1, IL-6 e IL-8) produzidas por monócitos e macrófagos ativados por LPS. A adição de IL-10 aos linfócitos B resulta em proliferação celular limitada, mas, principalmente, em produção muito alta de imunoglobulina, resultado da transformação de células B em plasmócitos. Por fim, as células natural killer (NK) parecem ser outro alvo para as propriedades anti-inflamatórias da IL-10. De fato, dados recentes demonstraram que a IL-10 pode inibir a produção de IFN-γ induzida por antigénio pelas células NK, inibindo não apenas a produção, mas também os efeitos estimulatórios da IL-12 e do TNF na produção de IFN-γ.

Descrição:
O kit ELISA para IL-10 é um imunoensaio de sensibilidade amplificada por enzima em fase sólida realizado em microplacas. O ensaio utiliza anticorpos monoclonais (MAbs) direcionados contra epítopos distintos de IL-10. Os calibradores e as amostras reagem com o anticorpo monoclonal de captura (MAb 1) revestido no poço de microtitulação e com um anticorpo monoclonal (MAb 2) marcado com HRP. Após um período de incubação que permite a formação de um sanduíche: MAb 1 revestido – IL-10 humana – MAb 2 – HRP, a microplaca é lavada para remover o anticorpo marcado com a enzima não ligada. O anticorpo marcado com a enzima ligada é medido por meio de uma reação cromogénica. A solução cromogénica (TMB) é adicionada e incubada. A reação é interrompida com a adição da solução de paragem e a microplaca é então lida no comprimento de onda apropriado. A quantidade de renovação do substrato é determinada colorimetricamente pela medição da absorvância, que é proporcional à concentração de IL-10. Uma curva de calibração é traçada e a concentração de IL-10 nas amostras é determinada por interpolação a partir da curva de calibração. O uso do leitor ELISA (linearidade de até 3 unidades OD) e um método sofisticado de redução de dados (redução policromática de dados) resultam em alta sensibilidade na faixa baixa e em uma faixa de calibração estendida.

Características do produto:
O kit contém reagentes para 96 ​​determinações;
Placa de microtitulação composta por 12x8 tiras (separáveis);
Leitor de microplacas a 450, 490, 650 nm;
Limite de deteção: 1,6 pg/mL;
IVD.