21-OH Ab ELISA

Imunoensaio enzimático para a determinação quantitativa de anticorpos anti-21-OH (21-OH Ab) em soro humano.

UTILIZAÇÃO PRETENDIDA: O kit ELISA RSR para autoanticorpos contra a 21-hidroxilase (21-OH Ab) destina-se exclusivamente a uso por profissionais, para a determinação quantitativa de 21-OH Ab em soro humano. A destruição autoimune do córtex adrenal é a causa mais comum da doença de Addison e os autoanticorpos contra a enzima adrenal específica esteroide 21-hidroxilase são importantes marcadores de autoimunidade adrenal. Isto pode ocorrer quando a doença se manifesta como doença de Addison ou como parte das síndromes poliglandulares autoimunes (APS) tipo I ou tipo II.

INFORMAÇÃO GERAL: No kit ELISA 21-OH Ab da RSR, os 21-OH Ab presentes no soro dos doentes, preparação de referência ou calibradores (opcional) e controlos interagem com a 21-OH revestida nos poços da placa ELISA. Após uma incubação de 16 a 20 horas, as amostras são descartadas, permanecendo os 21-OH Ab ligados à 21-OH imobilizada nos poços. A 21-OH-Biotina é adicionada numa segunda etapa de incubação, onde, através da capacidade bivalente dos 21-OH Ab, é formada uma ponte entre a 21-OH imobilizada na placa e a 21-OH-Biotina. A quantidade de 21-OH-Biotina ligada é então determinada numa terceira etapa de incubação, através da adição de peroxidase de estreptavidina (SA-POD), que se liga especificamente à biotina. O excesso de SA-POD não ligado é removido por lavagem e a adição do substrato de peroxidase 3,3’,5,5’-tetrametilbenzidina (TMB) resulta na formação de uma cor azul. Esta reação é interrompida pela adição de uma solução de paragem, fazendo com que o conteúdo dos poços adquira cor amarela. A absorvância da mistura reacional amarela é então medida a 450 nm e 405 nm utilizando um leitor de microplacas ELISA. Uma absorvância mais elevada indica a presença de 21-OH Ab na amostra em teste. A leitura a 405 nm permite a quantificação de absorvâncias elevadas. Recomenda-se que valores de baixa absorvância sejam medidos a 450 nm. Caso seja possível ler apenas a um comprimento de onda, pode ser utilizado 405 nm.

CARACTERÍSTICAS DO KIT:
- Método: ELISA
- 96 testes
- Tempo / Condições de incubação: 16-20 h (2-8°C), 1 h (RT/agitação), 20 min (RT/agitação), 20 min (RT/escuro)
- Intervalo padrão: 0,3 – 100 U/ml
- Sensibilidade analítica: 0,13 U/ml
- Volume final da amostra: 50 µl
- Tipo de amostra: soro
- Isótopo / Substrato: TMB 450 nm
- Controlos internos: 2
- Estado regulamentar: CE