ELISA IGF-I

Introdução:Os fatores de crescimento semelhantes à insulina (IGF) I e II desempenham um papel fundamental na regulação da proliferação, diferenciação e funções específicas de muitos tipos celulares. O IGF-I é idêntico à somatomedina C (Sm-C) e tem um peso molecular de 7649 Daltons. Seus principais reguladores são a hormna do crescimento (GH) e a nutrição, embora sua produção em tecidos específicos seja afetada por uma infinidade de hormonas trópicos e outros fatores de crescimento peptídicos. Em contraste com muitos outros hormonas peptídicos, os IGFs são avidamente ligados a proteínas de ligação específica (IGFBP). As sete classes de IGFBPs conhecidas atualmente ligam-se ao IGF-I e ao IGF-II com afinidades semelhantes ou mostram uma preferência pelo IGF-II. Um grande problema da medição do IGF-I resulta da interferência dos IGFBPs no ensaio. Determinações diretas em amostras de soro não tratadas fornecem valores falsos devido à dissociação extremamente lenta dos complexos IGF-I/IGFBP-3 durante a incubação do ensaio.

Descrição:
O kit ELISA para IGF-I DEE020 é um ensaio denominado Sanduíche. Ele utiliza dois anticorpos específicos e de alta afinidade para essa proteína. O IGF-I na amostra liga-se ao primeiro anticorpo imobilizado na placa de microtitulação, enquanto o segundo anticorpo anti-IGF-I específico, biotinilado e conjugado com estreptavidina-peroxidase, liga-se, por sua vez, ao IGF-I imobilizado. Na reação de fechamento do substrato, a mudança de cor será catalisada de forma altamente específica, dependendo quantitativamente do nível de IGF-I das amostras. Para dissociar o IGF-I das IGFBPs, as amostras devem ser diluídas em tampão ácido (tampão de amostra). As amostras diluídas são então pipetadas para os poços, neutralizando assim o valor do pH. Após a neutralização das amostras, o excesso de IGF-II ocupa os sítios de ligação do IGF das proteínas de ligação, permitindo assim a medição do IGF-I livre resultante. Com este método, as IGFBPs não são removidas, mas sua função e, portanto, sua interferência no ensaio são neutralizadas. Devido à baixíssima reatividade cruzada do anticorpo IGF-I com o IGF-II, o excesso de IGF-II não interfere na interação com o IGF-I. O teste é realizado como um ELISA convencional, utilizando um conjugado estreptavidina-peroxidase-enzima.

Características do produto:
O kit contém reagentes para 96 ​​determinações;
Placa de microtitulação composta por 12x8 tiras (separáveis);
Leitor de microplacas a 450/≥590 nm;
Sensibilidade analítica: 0,091 ng/mL;
IVD.