Ensaio imunoenzimático para a medição diagnóstica quantitativa de renina ativa em soro humano e plasma EDTA
Características
| Tecnologia | ELISA |
| Tamanhos | 96 testes |
Introdução:A renina é uma enzima (PM de 37 kDa) que pertence à família das proteases do ácido aspártico. A renina é um membro do Sistema Renina-Angiotensina-Aldosterona (SRAA) que controla a pressão arterial, o fluxo sanguíneo renal, a filtração glomerular e a homeostase de sódio/potássio. A renina é produzida constitutivamente como prorrenina, um precursor inativo com 386 aminoácidos, nas células justaglomerulares do rim. Em resposta à baixa pressão arterial intrarrenal, à reabsorção reduzida de sódio, à hipocalemia ou à atividade do sistema nervoso simpático, a renina ativa pode ser liberada de um depósito no rim ou gerada a partir da prorrenina pela clivagem de 46 aminoácidos no terminal N da prorrenina. A secreção de prorrenina no sangue é contínua, em contraste com a libertação rigorosamente controlada de renina, e a concentração sanguínea de prorrenina é aproximadamente 100 vezes maior do que a renina ativa. Após libertação e ativação, a renina solúvel medeia a clivagem da α2-globulina angiotensinogênio no peptído precursor angiotensina I, que é, por fim, processado pela enzima conversora de angiotensina (ECA) no octapeptídeo angiotensina II. Todas as ações da angiotensina II são mediadas pelos receptores de angiotensina tipo 1 (AT1) e angiotensina tipo 2 (AT2) acoplados à proteína G. Os efeitos fisiológicos diretos da Angiotensina II incluem vasoconstrição, aumento da reabsorção tubular de sódio e cloreto, retenção hídrica e libertação das hormonas aldosterona do córtex adrenal, hormona antidiurética (ADH, vasopressina) da hipófise posterior e hormona adrenocorticotrófica (ACTH, corticotropina) da hipófise anterior. A libertação dessas hormonas também auxilia na retenção de sódio e na secreção de potássio/H+ nos rins, além de aumentar a sensação de sede e o desejo por sal através do órgão subfornical do cérebro. Num ciclo de feedback negativo, a secreção de renina é reduzida pela alta concentração de angiotensina II, e a libertação de aldosterona é reduzida pela depleção de potássio. Além da ação da renina solúvel, a ligação da renina e da prorrenina ao receptor de renina ligado à membrana ATP6AP2 no cérebro, coração, placenta, fígado, rins e pâncreas aumenta a eficiência da clivagem do angiotensinogênio e induz efeitos intracelulares independentes da angiotensina, ativando as cinases ativadas por mitógeno ERK1 e ERK2. Além dos efeitos do sistema renina-angiotensina (SRA) no campo da fisiologia cardiovascular como o principal agente na homeostase da pressão arterial, outros efeitos foram descritos desde então, incluindo proliferação, fibrose e inflamação. A renina plasmática é um bom índice para a atividade do SRAA. Em caso de disfunção do SRAA, o ensaio de renina permitirá implicações clínicas para diagnóstico, tratamento e acompanhamento.
Descrição:
O kit ELISA para Renina é um ensaio imunoenzimático em fase sólida baseado no princípio sanduíche. Os poços de microtitulação são revestidos com um anticorpo monoclonal (camundongo) direcionado a um sítio antigénico específico da molécula ativa de Renina humana. Durante a primeira incubação (juntamente com o tampão de ensaio), a Renina na amostra adicionada liga-se ao anticorpo imobilizado. Após a incubação, os componentes não ligados são removidos por lavagem. O conjugado enzimático adicionado posteriormente, que contém anticorpo monoclonal anti-Renina conjugado à HRP, liga-se à Renina formando um complexo sanduíche. Após uma etapa de lavagem para remover todo o conjugado enzimático não ligado, a fase sólida é incubada com a solução de substrato. A reação colorimétrica é interrompida pela adição de uma solução de paragem, e a densidade óptica (DO) do produto amarelo resultante é medida. A intensidade da cor é proporcional à concentração do analito na amostra. Uma curva padrão é construída plotando os valores de DO em relação às concentrações dos padrões, e as concentrações de amostras desconhecidas são determinadas usando essa curva padrão.
Características do produto:
O kit contém reagentes para 96 determinações;
Placa de microtitulação composta por 12x8 (separável);
Leitor de microplacas a 450/620 nm;
Limite de detecção: 4.308 pg/mL;
IVD.