Cloranfenicol ELISA

Imunoensaio enzimático para determinação quantitativa de Cloranfenicol em matriz alimentar e urina.

Introdução: Devido às suas excelentes propriedades antibacterianas, o cloranfenicol é um antibiótico frequentemente usado na produção de leite, carne e ovos. Em humanos, leva a efeitos colaterais hematotóxicos, como a anemia aplástica induzida por cloranfenicol. Isso causou limites baixos na Alemanha, por exemplo 1 µg/kg para leite, carne e ovos.
Até agora a concentração de cloranfenicol era determinada por radioimunoensaio ou por cromatografia gasosa. No entanto, em comparação com os métodos convencionais, os imunoensaios enzimáticos apresentam algumas vantagens essenciais. Não há necessidade de trabalhar com material radioativo, o tempo de ensaio necessário é menor e a sensibilidade é melhor do que com métodos cromatográficos.
O teste de cloranfenicol fornece um ensaio rápido, sensível e confiável para a determinação de cloranfenicol em alimentos e urina. 40 amostras podem ser analisadas em duplicado em 60 minutos.

Descrição: O teste quantitativo de cloranfenicol é baseado no princípio do ensaio imunoenzimático. Uma proteína de ligação ao anticorpo é revestida na superfície de uma placa de microtitulação. Amostras ou padrões contendo cloranfenicol e um anticorpo dirigido contra cloranfenicol são administrados nos poços da placa de microtitulação. O cloranfenicol contido nas amostras ou padrões se ligará ao anticorpo que reage com a proteína de ligação revestida na placa de microtitulação. Após 30 minutos de incubação à temperatura ambiente, um conjugado de cloranfenicol-peroxidase é adicionado aos poços sem uma etapa de lavagem anterior para saturar os locais de ligação do anticorpo livre. Após mais 15 minutos de incubação à temperatura ambiente, os poços são lavados com solução de lavagem diluída para remover o material não ligado. Uma solução de substrato é adicionada e incubada por 15 minutos, resultando no desenvolvimento de uma cor azul. O desenvolvimento da cor é inibido pela adição de uma solução stop e a cor fica amarela. A cor amarela é medida fotometricamente a 450 nm. A concentração de cloranfenicol é indiretamente proporcional à intensidade da cor da amostra de teste.

Características do produto:
- O kit contém reagentes para 96 ​​determinações;
- Placa de microtitulação composta por 12 tiras com 8 poços quebráveis;
- Padrões de cloranfenicol: 0, 0.05, 0.1, 0.5, 1, 5 ng/mL;
- Leitor de ELISA a 450 nm;
- Faixa padrão: 0.05 - 5 ng/mL;
- Sensibilidade analítica: 0.03 ng/mL.