Penicilina ELISA

Imunoensaio enzimático para determinação quantitativa de Penicilina em leite e camarões.

Introdução: A penicilina foi detetada acidentalmente por Alexander Fleming em 1929. A droga pertence às micotoxinas e é gerada pelo fungo Penicillium chrysogenum. A penicilina como antibiótico é utilizada preferencialmente no tratamento de bactérias gram-positivas, tanto para humanos quanto para animais. De todas as drogas administradas ilegalmente, os antibióticos são os mais usados ​​na pecuária produtiva. As contaminações em alimentos ou leite são ingeridas por humanos e podem levar a infeções graves por germes patogénicos que se tornaram resistentes à penicilina ou a alergias. As reações alérgicas aparecem com gravidade diferente, dependendo da dose e disposição individual, e apresentando sintomas de urticária a choque anafilático. Durante o teste de rotina de amostras de leite para antibióticos, em mais de 90% dos casos positivos, são detetadas preparações de beta-lactâmicos ou penicilinas. O método de escolha para a determinação da contaminação por penicilina em alimentos sempre foi o ensaio microbiológico. Esses procedimentos não permitem, no entanto, nenhuma determinação quantitativa e nenhuma identificação do antibiótico, o que é obtido por um kit de teste ELISA sensível ou colunas de imunoafinidade juntamente com HPLC.

Descrição: O teste quantitativo de penicilina baseia-se no princípio do ensaio de imunoabsorção ligado a enzima. Um conjugado de penicilina é ligado à superfície de uma placa de microtitulação. Amostras ou padrões contendo penicilina e um anticorpo dirigido contra a penicilina são administrados nos poços da placa de microtitulação. A penicilina imobilizada e livre competem pelos sítios de ligação do anticorpo. Após uma hora de incubação à temperatura ambiente, os poços são lavados com solução de lavagem diluída para remover o material não ligado. Um conjugado de peroxidase dirigido contra o anticorpo penicilina é administrado nos poços e após outra hora de incubação, a placa é lavada novamente. Em seguida, uma solução de substrato é adicionada e incubada por 20 minutos, resultando no desenvolvimento de uma cor azul. O desenvolvimento da cor é inibido pela adição de uma solução stop e a cor fica amarela. A cor amarela é medida fotometricamente a 450 nm. A concentração de penicilina é indiretamente proporcional à intensidade da cor da amostra de teste.

Características do produto:
- O kit contém reagentes para 96 ​​determinações;
- Placa de microtitulação composta por 12 tiras com 8 poços quebráveis;
- Padrões de penicilina: 0, 4, 10, 40, 100, 400 ng/mL;
- Leitor de ELISA a 450 nm;
- Faixa padrão: 4 - 400 ng/mL;
- Sensibilidade analítica: 3 ng/mL